ARV1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-407460-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ARV1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ARV1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ARV1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ARV1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ARV1 Anticorpo (4G12): sc-517099
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ARV1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-407460-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ARV1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-407460-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ARV1 (regulador da homeostase lipídica ARV1) codifica uma proteína multipasso de membrana localizada no retículo endoplasmático, implicada na homeostase de esteróis e esfingolipídios e na organização da membrana do RE. ARV1 contribui para o tráfego intracelular de lipídios e pode influenciar respostas ao estresse do RE e processos dependentes da composição da membrana, ligando-o a vias que regulam o metabolismo lipídico e o processamento de proteínas no sistema secretório. Alterações na função de ARV1 têm sido associadas, em estudos genéticos, a fenótipos de neurodesenvolvimento e convulsões, em consonância com um papel do equilíbrio lipídico na viabilidade e na sinalização neuronal. Em modelos celulares, a perturbação de ARV1 pode ser usada para investigar como a composição lipídica do RE afeta o tráfego, a proteostase e a adaptação metabólica.
ARV1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ARV1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ARV1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ARV1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ARV1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.