Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Plásmido Doble Nickase (h) ARRDC1: sc-407858-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ARRDC1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ARRDC1 (h) y el plásmido de doble nickasa ARRDC1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ARRDC1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ARRDC1 Anticuerpo (E-6): sc-398652
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ARRDC1 | sc-407858-NIC | 20 µg | $410.00 |
Arrestina con dominio 1 (ARRDC1) es un adaptador asociado a la membrana plasmática implicado en el tráfico endosomal y en la regulación dependiente de ubiquitina del recambio de proteínas de membrana. ARRDC1 recluta ligasas E3 de ubiquitina de la familia NEDD4 para promover la ubiquitinación de la carga y participa en la generación de microvesículas mediadas por ARRDC1, lo que la vincula con la biogénesis de vesículas extracelulares y la comunicación intercelular. A través de estas funciones, ARRDC1 influye en la dinámica de señalización de receptores, incluidas vías que dependen de la internalización y el reciclaje de receptores de membrana. La desregulación del tráfico vesicular y de la señalización por ubiquitina en la que participa ARRDC1 se ha explorado en contextos como la señalización de células cancerosas y los procesos de gemación viral, lo que la hace relevante para estudios mecanísticos de remodelación de membranas.
ARRDC1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ARRDC1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ARRDC1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ARRDC1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ARRDC1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.