ARP-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405241

Descripción general

NR2F2 codifica el receptor nuclear huérfano humano ARP-1 (también conocido como COUP-TFII), un factor de transcripción independiente de ligando que se une al ADN como monodímero o heterodímero para regular programas génicos del desarrollo y del metabolismo. ARP-1 integra señales que determinan decisiones de destino celular, procesos angiogénicos y linfangiogénicos, y la organogénesis mediante el control transcripcional de redes vinculadas al diálogo cruzado entre receptores nucleares y a la actividad de potenciadores (enhancers). En tejidos adultos, NR2F2 influye en la biología del músculo liso vascular y del endotelio, la adipogénesis y la homeostasis mitocondrial/metabólica, con efectos dependientes del contexto sobre la proliferación y la diferenciación. La desregulación de la expresión o la actividad de NR2F2 se ha asociado con la biología del cáncer, defectos cardiovasculares congénitos y trastornos metabólicos, lo que lo convierte en un nodo ampliamente utilizado para estudios mecanísticos de la regulación transcripcional y la especificación de linajes.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ARP-1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen NR2F2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del NR2F2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de NR2F2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ARP-1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en NR2F2 para la investigación de la señalización de ARP-1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de NR2F2 críticos para la función de ARP-1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de NR2F2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ARP-1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido ARP-1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus NR2F2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ARP-1 (h) y el plásmido HDR ARP-1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología NR2F2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana NR2F2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.