Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (m) ARG1/Arignase 1: sc-419192-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) ARG1/Arignase 1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ARG1/Arignase 1 Double Nickase (m) et le plasmide ARG1/Arignase 1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Arg1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ARG1/Arginase 1 Antibody (E-2): sc-271430
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) ARG1/Arignase 1 | sc-419192-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène Arg1 de la souris code l’arginase 1 (ARG1), une métalloprotéine cytosolique qui hydrolyse la L-arginine en L-ornithine et en urée, étape clé du cycle de l’urée et de l’élimination de l’azote. En modulant la disponibilité intracellulaire en arginine, ARG1 influence la biosynthèse des polyamines et de la proline via le métabolisme de l’ornithine, et peut façonner la signalisation du monoxyde d’azote en entrant en compétition avec les NO synthases. L’expression de Arg1 est particulièrement marquée dans les hépatocytes et peut aussi être induite dans les cellules myéloïdes, où elle participe à des programmes immunométaboliques associés à la résolution de l’inflammation et au remodelage tissulaire. Une catabolisation dérégulée de l’arginine a été associée, dans des modèles murins, à des altérations du métabolisme hépatique et à des phénotypes du microenvironnement immunitaire pertinents pour la fibrose, la fonction des cellules myéloïdes associées aux tumeurs et d’autres contextes pathologiques.
ARG1/Arignase 1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Arg1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Arg1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Arg1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Arg1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.