apoC-II CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-419164

Übersicht

Mouse Apoc2 kodiert Apolipoprotein C-II (ApoC-II), ein sezerniertes Apolipoprotein, das als essenzieller Kofaktor der Lipoproteinlipase dient. Es fördert die Hydrolyse von Triglyzeriden in Chylomikronen und VLDL und ermöglicht so die Aufnahme der freigesetzten Fettsäuren durch periphere Gewebe. Über diese Funktion ist ApoC-II zentral für die Clearance von Plasma-Triglyzeriden und den Lipidtransport und verknüpft die intestinale Lipidabsorption sowie die hepatische Lipoproteinproduktion mit dem Energiestoffwechsel. Störungen der APOC2-Funktion sind mit schwerer Hypertriglyzeridämie und Dyslipoproteinämie-Phänotypen assoziiert und bieten einen mechanistischen Ansatzpunkt zur Untersuchung der Lipidhomöostase und nachgeschalteter metabolischer Stressantworten. Apoc2-fokussierte Modelle eignen sich daher, um Signalwege zu analysieren, die Lipolyse, Fettsäurefluss und Lipoprotein-Remodeling miteinander verbinden.

Das apoC-II CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Apoc2-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Apoc2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Apoc2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die apoC-II-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Apoc2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der apoC-II-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Apoc2-Exone abzielen, die für die apoC-II-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Apoc2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom apoC-II CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom apoC-II CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Apoc2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das apoC-II HDR-Plasmid (m) und apoC-II HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Apoc2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Apoc2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.