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apoB双切口酶质粒(h) | sc-400705-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
apoB双切口酶质粒(h2) | sc-400705-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
APOB 编码载脂蛋白B(apoB)。apoB 是致动脉粥样硬化脂蛋白的关键结构组分,在肝细胞中作为骨架支撑极低密度脂蛋白(VLDL)的组装,并被加工为 apoB-100 进入循环。apoB 通过涉及微粒体甘油三酯转运蛋白(MTP)及内质网分泌程序等通路,协调富含甘油三酯和胆固醇颗粒的脂化与分泌。在外周组织中,含 apoB 的脂蛋白是 LDL 受体介导摄取的核心,将脂质运输与细胞胆固醇稳态及下游信号传导相耦联。APOB 表达或 apoB 颗粒生成的扰动与血脂异常及脂质驱动的血管病理相关,因此它是研究脂蛋白代谢机制的核心靶点。
apoB 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 APOB 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对APOB内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏APOB的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了APOB基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。