Plasmide Double Nickase (h) apoA-IV: sc-402217-NIC

APOA4 code l'apolipoprotéine A‑IV (apoA‑IV), une apolipoprotéine d'origine intestinale associée aux lipides, sécrétée avec les chylomicrons et des particules de type HDL lors de l'absorption des graisses alimentaires. L'apoA‑IV contribue au remodelage des lipoprotéines et au transport inverse du cholestérol, et influence le métabolisme des lipoprotéines riches en triglycérides via des interactions avec des enzymes et des protéines de transfert qui régulent les flux lipidiques dans le plasma. Par ces activités, elle relie la gestion intestinale des lipides à l'homéostasie lipidique systémique et à la signalisation inflammatoire associée aux processus athéroscléreux. Les variations de l'expression ou de la fonction d'APOA4 ont été étudiées dans le contexte des dyslipidémies, des traits cardiométaboliques et des états inflammatoires induits par les lipides, pertinents pour les mécanismes des maladies vasculaires et métaboliques.

apoA-IV Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus APOA4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de APOA4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de APOA4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de APOA4.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.