Plasmide CRISPR/Cas9 KO AP4A Hydrolase (r): sc-437371
- Espèces cibles: rat
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- AP4A Hydrolase Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (r) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique AP4A Hydrolase, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: AP4A Hydrolase Antibody (F-5): sc-271410
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO AP4A Hydrolase (r) | sc-437371 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
L’hydrolase AP4A est une enzyme du métabolisme des nucléotides qui hydrolyse le tétraphosphate de diadénosine (Ap4A), une molécule de signalisation pléiotrope de type « alarmone » dont l’abondance augmente lors d’un stress cellulaire. En contrôlant le renouvellement de l’Ap4A, l’enzyme contribue à l’homéostasie des nucléotides et influence des processus en aval liés à l’adaptation au stress, à l’équilibre rédox et à la régulation de protéines se liant aux acides nucléiques. Des altérations du métabolisme de l’Ap4A ont été associées à des modifications de la prolifération, de la signalisation inflammatoire et de la fonction neuronale, ce qui fait de l’hydrolase AP4A une cible pertinente pour des études mécanistiques de phénotypes cardiométaboliques, neurobiologiques et immunitaires dans des modèles de rat. Son activité recoupe largement des voies qui gouvernent le traitement de l’ARN/ADN et les réponses au stress cellulaire, où des seconds messagers dinucléotidiques agissent comme modulateurs.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO AP4A Hydrolase (r) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène dans les lignées cellulaires rat. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du , ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine AP4A Hydrolase.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en pour l'étude de la signalisation de AP4A Hydrolase, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de essentiels à la fonction de AP4A Hydrolase
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le AP4A Hydrolase plasmide CRISPR/Cas9 KO (r) et le AP4A Hydrolase plasmide CRISPR/Cas9 KO (r2) ciblent des sites distincts au sein du locus . Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le AP4A Hydrolase plasmide HDR (r) et le AP4A Hydrolase (r2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.