Plasmide Double Nickase (h) AOX1: sc-403997-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) AOX1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide AOX1 Double Nickase (h) et le plasmide AOX1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant AOX1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: AOX1 Antibody (D-8): sc-365291
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) AOX1 | sc-403997-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) AOX1 | sc-403997-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
L’aldéhyde oxydase 1 (AOX1) est une molybdo-flavoenzyme cytosolique qui catalyse l’oxydation d’une grande diversité d’aldéhydes et de composés N‑hétérocycliques, contribuant au métabolisme des xénobiotiques de phase I et à l’équilibre rédox cellulaire. En générant des espèces réactives de l’oxygène lors du turnover des substrats, AOX1 peut moduler des voies de signalisation sensibles au stress oxydant et les programmes inflammatoires en aval. L’expression d’AOX1 est marquée dans le foie et d’autres tissus à forte activité métabolique, où elle s’inscrit dans des réseaux plus larges de métabolisme des médicaments et de détoxification. Des altérations de l’activité d’AOX1 ou de sa régulation ont été associées à des variations interindividuelles de la prise en charge des xénobiotiques et ont été étudiées dans des contextes de dysfonction hépatique et de physiopathologie liée au stress oxydant.
AOX1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus AOX1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de AOX1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de AOX1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de AOX1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.