ANO6 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-430612-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ANO6O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ANO6 (m) e o Plasmídeo Double Nickase ANO6 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Ano6. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ANO6 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-430612-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ANO6 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-430612-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Ano6 de camundongo codifica a ANO6 (também conhecida como TMEM16F), uma escramblase de fosfolipídios e canal iônico ativados por Ca2+ que regula a assimetria lipídica da membrana plasmática e a exposição de fosfatidilserina. A atividade da ANO6 integra a sinalização intracelular de cálcio a processos de remodelamento de membrana, incluindo alterações de superfície relacionadas à coagulação, liberação de vesículas e morte celular regulada. Em contextos imunológicos e hematopoéticos, a ANO6 influencia a função pró-coagulante das plaquetas e a dinâmica de membrana de macrófagos ou linfócitos, ligando-a a vias que controlam a hemostasia e a inflamação. A desregulação da “scrambling” dependente de ANO6 tem sido associada a fenótipos hemorrágicos e a alterações na depuração celular, tornando Ano6 um alvo útil para estudar a homeostase de membrana e redes de sinalização dependentes de Ca2+ em modelos murinos.
ANO6 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Ano6 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Ano6. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Ano6. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Ano6 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.