Plásmido Doble Nickase (h) Annexin-2/ANXA2: sc-400296-NIC

ANXA2 codifica la anexina A2, una proteína de unión a fosfolípidos dependiente de Ca²⁺ que se asocia con la membrana plasmática y la actina cortical para coordinar el tráfico de membranas, la remodelación del citoesqueleto y la motilidad celular. La anexina A2 funciona en complejos con S100A10 para favorecer la generación de plasmina y la proteólisis pericelular, lo que la vincula al recambio de la matriz extracelular y a la señalización asociada a heridas. Contribuye a la endocitosis/exocitosis, a la organización de las balsas lipídicas y a la regulación de vías fibrinolíticas e inflamatorias. Se ha descrito una expresión o localización desregulada de ANXA2 en múltiples tipos de tumores y en afecciones vasculares/inflamatorias, lo que la convierte en un nodo útil para estudiar la invasión, las respuestas angiogénicas y la dinámica de membrana adaptativa al estrés.

Annexin-2/ANXA2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ANXA2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ANXA2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ANXA2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ANXA2 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.