Plasmide Double Nickase (h) Amylase: sc-400533-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Amylase 2a correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Amylase 2a Double Nickase (h) et le plasmide Amylase 2a Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant AMY2A. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Amylase | sc-400533-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Amylase 2a | sc-400533-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AMY2A code l’α-amylase pancréatique, une glycoside hydrolase sécrétée qui initie la digestion de l’amidon alimentaire en clivant des liaisons glycosidiques internes α-1,4 afin de produire du maltose et des oligosaccharides. Son expression est étroitement associée à l’identité des cellules acinaires et à des programmes de sécrétion régulés, et s’intègre aux voies de l’exocrine pancréatique qui soutiennent le traitement des nutriments et l’homéostasie des enzymes digestives. AMY2A est couramment utilisée comme marqueur fonctionnel de la différenciation exocrine pancréatique et de la production enzymatique dans des modèles cellulaires et des organoïdes. Les variations d’abondance ou d’activité de l’amylase sont fréquemment évaluées dans des études portant sur le stress pancréatique et les états inflammatoires, ainsi que dans des contextes métaboliques susceptibles d’influencer la capacité digestive.
Amylase 2a Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus AMY2A dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de AMY2A. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de AMY2A. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de AMY2A.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.