Plasmide Double Nickase (h) ALS2CL: sc-417873-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ALS2CL correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ALS2CL Double Nickase (h) et le plasmide ALS2CL Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ALS2CL. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ALS2CL Antibody (E-8): sc-377278
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ALS2CL | sc-417873-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ALS2CL | sc-417873-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ALS2CL (ALS2 C-terminal like) code une protéine cytosolique impliquée dans le trafic membranaire et la dynamique endosomale, avec des interactions rapportées qui la relient à des voies de transport régulées par de petites GTPases. ALS2CL est étudié dans le contexte de la biologie cellulaire neuronale, où la maturation des endosomes, le recyclage vésiculaire et le couplage au cytosquelette sont essentiels au maintien de l’homéostasie axonale et de la signalisation. Une régulation altérée du transport endolysosomal et des voies de protéostasie associées est pertinente dans la neurodégénérescence, et ALS2CL a été étudié en parallèle des mécanismes associés à ALS2 dans la vulnérabilité des motoneurones. En conséquence, ALS2CL est fréquemment utilisé comme nœud pour explorer le trafic intracellulaire, les réponses au stress et les programmes de maintenance neuronale dans des modèles cellulaires humains.
ALS2CL Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ALS2CL dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ALS2CL. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ALS2CL. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ALS2CL.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.