Plasmide Double Nickase (h) Aldolase A: sc-401349-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Aldolase A correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Aldolase A Double Nickase (h) et le plasmide Aldolase A Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ALDOA. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Aldolase A Antibody (C-10): sc-390733
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Aldolase A | sc-401349-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Aldolase A | sc-401349-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ALDOA code l’enzyme glycolytique aldolase A, qui catalyse le clivage réversible du fructose-1,6-bisphosphate en glycéraldéhyde-3-phosphate et en dihydroxyacétone phosphate, contribuant à la production d’ATP et au flux de carbone à travers le métabolisme central. Au-delà de la glycolyse et de la néoglucogenèse, l’aldolase A peut influencer l’architecture cellulaire via des interactions avec des composants du cytosquelette, reliant l’état métabolique à la motilité et aux réponses au stress. Une expression ou une activité d’ALDOA altérée a été associée au remodelage métabolique observé dans des contextes prolifératifs et hypoxiques, notamment en cancérologie, ainsi qu’à des troubles affectant la physiologie musculaire et des globules rouges. Ces caractéristiques font d’ALDOA un nœud d’étude utile pour explorer l’homéostasie énergétique, la plasticité métabolique et les conséquences en aval, au niveau de la signalisation, des perturbations de la glycolyse.
Aldolase A Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ALDOA dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ALDOA. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ALDOA. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ALDOA.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.