Plasmide Double Nickase (h) AKR7A2: sc-403377-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) AKR7A2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide AKR7A2 Double Nickase (h) et le plasmide AKR7A2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant AKR7A2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: AKR7A2 Antibody (Y02): sc-100503
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) AKR7A2 | sc-403377-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) AKR7A2 | sc-403377-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AKR7A2 code l’aldo-céto réductase de la famille 7, membre A2, une oxydoréductase cytosolique dépendante du NADPH qui catalyse la réduction d’aldéhydes et de cétones réactifs générés lors du métabolisme des xénobiotiques et de la peroxydation lipidique. En détoxifiant des espèces carbonylées électrophiles, AKR7A2 contribue à l’homéostasie redox cellulaire et à la protection contre le stress oxydatif et carbonylé, à l’interface du métabolisme des aldéhydes et de réseaux métaboliques plus larges de phase I/phase II. Une altération de la prise en charge des aldéhydes réactifs a été associée à des lésions tissulaires et à l’inflammation, et les variations d’activité d’AKR7A2 sont étudiées dans des contextes où le stress métabolique et le traitement des cancérogènes influencent la viabilité cellulaire et l’intégrité du génome. Ces propriétés font d’AKR7A2 une cible utile pour explorer, dans des modèles de cellules humaines, les mécanismes de détoxification, la signalisation adaptative au stress et les phénotypes de maladies associés au métabolisme.
AKR7A2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus AKR7A2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de AKR7A2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de AKR7A2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de AKR7A2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.