Plasmide CRISPR/Cas9 KO AKAP 9 (h): sc-405430
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- AKAP 9 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique AKAP 9, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: AKAP 9 Antibody (7E12): sc-517030
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO AKAP 9 (h) | sc-405430 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
AKAP9 code la protéine d’ancrage de l’A-kinase 9 (AKAP9), une grande protéine échafaudage qui organise spatialement la PKA ainsi que d’autres enzymes de signalisation dans des sites subcellulaires définis. AKAP9 se localise aux centrosomes et à l’appareil de Golgi, contribuant à l’organisation des microtubules, à l’intégrité du Golgi et à la coordination de la progression du cycle cellulaire et de la dynamique du fuseau mitotique. Grâce à une signalisation kinase compartimentée, elle influence des processus dépendants de la phosphorylation qui régulent le remodelage du cytosquelette et le trafic intracellulaire. Une expression altérée d’AKAP9 ou des réarrangements ont été rapportés dans le cancer et d’autres troubles prolifératifs, ce qui en fait une cible utile pour étudier les réseaux de signalisation dérégulés et la stabilité chromosomique.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO AKAP 9 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène AKAP9 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du AKAP9, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert AKAP9 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine AKAP 9.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en AKAP9 pour l'étude de la signalisation de AKAP 9, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de AKAP9 essentiels à la fonction de AKAP 9
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de AKAP9 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le AKAP 9 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le AKAP 9 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus AKAP9. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le AKAP 9 plasmide HDR (h) et le AKAP 9 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie AKAP9 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles AKAP9 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.