Adenylate cyclase 7/AC7/ADCY7 Double Nickase Plasmid (h): sc-403213-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Adenylate cyclase 7/AC7/ADCY7 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Adenylate cyclase 7/AC7/ADCY7 Double-Nickase-Plasmid (h) und Adenylate cyclase 7/AC7/ADCY7 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf ADCY7 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Adenylate cyclase 7/AC7/ADCY7 Double Nickase Plasmid (h) | sc-403213-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Adenylate cyclase 7/AC7/ADCY7 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-403213-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ADCY7 kodiert die Adenylatcyclase 7 (AC7), ein membranassoziiertes Enzym, das die Umwandlung von ATP zu zyklischem AMP (cAMP) katalysiert – einem zentralen Second Messenger, der PKA- und EPAC-abhängige Signalwege steuert. Die Aktivität von AC7 wird nachgeschaltet von GPCRs über heterotrimere G-Proteine reguliert und verknüpft so extrazelluläre Reize mit Transkriptionsprogrammen, Zytokinsignalen und der Aktivierung angeborener Immunzellen. Durch die Modulation der cAMP-Dynamik trägt ADCY7 zu Signalwegen bei, die Entzündungsreaktionen, zelluläre Stresssignale und die metabolische Regulation kontrollieren. Genetische Varianten oder eine fehlregulierte Expression von ADCY7 wurden mit veränderter Immunhomöostase und einer erhöhten Anfälligkeit für entzündliche Erkrankungen in Verbindung gebracht, was mechanistische Studien in geeigneten menschlichen Zellmodellen motiviert.
Adenylate cyclase 7/AC7/ADCY7 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des ADCY7-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von ADCY7 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die ADCY7-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit ADCY7-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.