Adenylate cyclase 4/AC4/ADCY4 CRISPR Activation Plasmid (h): sc-403016-ACT
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Adenylate cyclase 4/AC4/ADCY4 CRISPR Activation Plasmid (h) ist ein Transkriptionsaktivierungs System (SAM) welches für die gezielte Verstärkung der Genexpression bestimmt ist
- Adenylate cyclase 4/AC4/ADCY4 CRISPR Aktivierungsplasmide (h) bestehen aus 3 Plasmiden im Massenverhältnis 1:1:1: ein Plasmid kodiert für die deaktivierte Cas9 (dCas9) Nuklease (D10A und N863A) fusioniert an die Transaktivierungsdomaine VP64 sowie ein Gen für die Blasticidin Resistenz; ein zweites Plasmid kodierend für das MS2-p65-HSF1 Fusionsprotein sowie ein Gen für die Hygromycin Resistenz; ein drittes Plasmid kodierd für die Ziel-spezifische 20 nt guide RNA fusioniert an zwei MS2 RNA Aptamere sowie ein Gen für die Puromycin Resistenz.
- Der entstehende SAM-Komplex (Mediator-Komplex zur synergistischen Gen-Aktivierung) bindet eine sequenzspezifische Region 200-250 nt upstream (in 5'-Richtung) des Transkriptionsstartsignals und rekrutiert dort ständig Transkriptionsfaktoren für eine verstärkte Gen-Aktivierung und Gen-Expression.
- Die vom Adenylate cyclase 4/AC4/ADCY4 CRISPR-Aktivierungsplasmid (h) und vom Adenylate cyclase 4/AC4/ADCY4 CRISPR-Aktivierungsplasmid (h2) kodierten gRNAs zielen auf unterschiedliche regulatorische Regionen stromaufwärts der ADCY4-Transkriptionsstartstelle ab. Eines oder beide Designs sind möglicherweise verfügbar
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| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Adenylate cyclase 4/AC4/ADCY4 CRISPR Activation Plasmid (h) | sc-403016-ACT | 20 µg | $397.00 |
Das humane Gen **ADCY4** kodiert die Adenylatcyclase 4 (AC4), ein membranassoziiertes Enzym, das nachgeschaltet an die Signalübertragung über G‑Protein‑gekoppelte Rezeptoren ATP in zyklisches AMP umwandelt. Durch die Modulation cAMP/PKA‑ sowie EPAC‑abhängiger Signalwege beeinflusst AC4 Phosphorylierungskaskaden, Transkriptionsprogramme und zelluläre Antworten wie Sekretion, Stoffwechsel und inflammatorische Signalgebung. Die ADCY4‑Aktivität ist in calcium‑ und Gαs‑regulierte Inputs integriert und prägt so in verschiedenen Zelltypen die Amplitude und Dauer der Dynamik von Second Messengern. Eine veränderte Regulation von cAMP‑Signalnetzwerken unter Beteiligung von ADCY4 wurde im Kontext kardiometabolischer Merkmale und immunbezogener Prozesse untersucht, was seine Nutzung als mechanistischer Knotenpunkt in Pathway‑Studien unterstützt.
Adenylate cyclase 4/AC4/ADCY4 Das CRISPR-Aktivierungsplasmid (h) bietet einen gezielten, nicht-destruktiven Ansatz zur Hochregulierung der endogenen ADCY4-Expression, ohne die zugrunde liegende DNA-Sequenz zu verändern.
Adenylate cyclase 4/AC4/ADCY4 Das CRISPR-Aktivierungsplasmid (h) ist ein aus drei Plasmiden bestehendes synergistisches Aktivierungsmediator-System (SAM), das für eine hocheffiziente, ortsspezifische transkriptionelle Hochregulation des ADCY4-Lokus in menschlichen Zelllinien entwickelt wurde. Das System basiert auf einem katalytisch inaktiven Cas9 (dCas9), das zwei inaktivierende Mutationen (D10A und N863A) trägt, welche die Nukleaseaktivität eliminieren, während die DNA-Bindung erhalten bleibt. Dieses dCas9 ist mit VP64, einem potenten Transkriptionsaktivator, fusioniert und wird zusammen mit einem Blasticidin-Resistenzgen zur Selektion koexprimiert. Das zweite Plasmid kodiert das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein, einen sekundären Aktivatorkomplex, der zusammen mit dCas9-VP64 wirkt, sowie ein Hygromycin-Resistenzgen. Das dritte Plasmid kodiert für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA, die an zwei MS2-RNA-Aptamere fusioniert ist, welche den MS2-p65-HSF1-Komplex an die Aktivierungsstelle rekrutieren, begleitet von einem Puromycin-Resistenzgen. Die drei Plasmide werden im Massenverhältnis 1:1:1 verabreicht, um eine ausgewogene Expression aller Systemkomponenten zu gewährleisten.
Nach der Assemblierung am Zielort bindet der SAM-Komplex etwa 200 bp stromaufwärts der ADCY4-Transkriptionsstartstelle, wo VP64, p65 und HSF1 gemeinsam die Transkriptionsmaschinerie rekrutieren und die Hochregulation der endogenen Adenylate cyclase 4/AC4/ADCY4-Expression vorantreiben. Im Gegensatz zu nukleaseaktivem Cas9 verursacht dCas9 keine Doppelstrangbrüche und verändert die genomische Sequenz nicht, wodurch der native ADCY4-Locus erhalten bleibt und die Untersuchung von Adenylate cyclase 4/AC4/ADCY4-abhängigen Transkriptionsreaktionen am endogenen Locus ermöglicht wird. Dies macht es zu einem wertvollen Werkzeug für Funktionsstudien, die Identifizierung von Zielgenen und die Modellierung der Wiederherstellung des Adenylate cyclase 4/AC4/ADCY4-Signalwegs in Tumorzellen mit stillgelegtem oder reduziertem ADCY4-Ausdruck.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.