adenosine deaminase CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-402201

概述

人类 ADA 基因编码腺苷脱氨酶（adenosine deaminase, ADA），这是一种胞质酶，催化腺苷和脱氧腺苷脱氨生成肌苷及其衍生物，从而维持嘌呤稳态并调控细胞内脱氧腺苷核苷酸库。通过控制具有免疫调节作用的腺苷水平以及可能具有细胞毒性的脱氧腺苷代谢物水平，ADA 影响淋巴细胞的发育、增殖以及与细胞应激和代谢控制相关的信号网络。ADA 活性与嘌呤补救与分解代谢通路相交织，从而塑造核苷酸平衡、DNA 合成能力以及由腺苷受体介导的信号传导，并在免疫组织与非免疫组织中发挥作用。ADA 的遗传性破坏与严重免疫缺陷表型相关，并被广泛用于研究嘌呤能代谢、免疫细胞存活以及代谢物驱动的基因表达调控。

adenosine deaminase CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中ADA基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对ADA基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。

多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏ADA开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使adenosine deaminase蛋白表达失活。

该CRISPR敲除系统能够高效构建ADA缺失的细胞模型，用于adenosine deaminase信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。

主要特点

• 针对对 adenosine deaminase 功能至关重要的 ADA 外显子的 sgRNA
  通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
  GFP 报告基因用于识别转染细胞
  针对多个 ADA 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
  兼容转染递送

设计变体

CRISPRs +/- HDR

• 由 adenosine deaminase CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 adenosine deaminase CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 ADA 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
  由 adenosine deaminase HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 adenosine deaminase HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由ADA同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定ADA靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。