Plasmide Double Nickase (h) Adenosine A2A-R: sc-400807-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Adenosine A2A-R correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Adenosine A2A-R Double Nickase (h) et le plasmide Adenosine A2A-R Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ADORA2A. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Adenosine A2A-R Antibody (7F6-G5-A2): sc-32261
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Adenosine A2A-R | sc-400807-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Adenosine A2A-R | sc-400807-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ADORA2A code le récepteur humain de l’adénosine A2A (Adenosine A2A-R), un GPCR couplé à Gs qui augmente l’AMPc intracellulaire et active une transcription dépendante de PKA/CREB en réponse à l’adénosine extracellulaire. Cet axe de signalisation module la neurotransmission, la vasodilatation et la fonction des cellules immunitaires, en intégrant les signaux de stress métabolique aux réponses cellulaires. Le récepteur A2A communique avec les voies dopaminergiques et glutamatergiques et façonne la signalisation inflammatoire via une régulation, médiée par l’AMPc, de la production de cytokines et de l’activité des lymphocytes T. Une dérégulation de la signalisation ADORA2A a été impliquée dans des troubles neurodégénératifs et neuropsychiatriques, l’immunosuppression associée au microenvironnement tumoral, ainsi que des processus inflammatoires cardiopulmonaires, ce qui soutient son utilisation comme cible mécanistique dans des modèles pertinents pour la maladie.
Adenosine A2A-R Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ADORA2A dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ADORA2A. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ADORA2A. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ADORA2A.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.