ADAM10 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400883-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ADAM10O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ADAM10 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ADAM10 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ADAM10. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ADAM10 Anticorpo (B-3): sc-28358
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ADAM10 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400883-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ADAM10 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400883-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ADAM10 codifica uma metaloprotease transmembranar dependente de zinco da família ADAM, que medeia o “shedding” (clivagem/libertação) do ectodomínio de diversas proteínas da superfície celular, remodelando assim a disponibilidade de recetores e a comunicação célula–célula. O ADAM10 participa na proteólise intramembranar regulada e influencia a sinalização Notch, o processamento de APP e a clivagem de moléculas de adesão e de modulação imunitária, como caderinas, ligandos e recetores de citocinas. Por meio destas atividades, afeta o desenvolvimento neuronal, a função sináptica, a biologia da barreira epitelial e as respostas imunitárias, integrando sinais em redes de sinalização próximas da membrana. A atividade ou expressão desregulada de ADAM10 tem sido implicada em sinalização e fenótipos de invasão associados ao cancro, em mecanismos neurodegenerativos ligados ao metabolismo de APP e na fisiopatologia inflamatória, o que sustenta o seu valor como alvo mecanístico em estudos de vias.
ADAM10 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ADAM10 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ADAM10. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ADAM10. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ADAM10 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.