Plasmide Double Nickase (h) ACTR-IIB: sc-401414-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ACTR-IIB correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ACTR-IIB Double Nickase (h) et le plasmide ACTR-IIB Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ACVR2B. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ACTR-IIB Antibody (G-7): sc-376593
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ACTR-IIB | sc-401414-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ACTR-IIB | sc-401414-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ACVR2B code le récepteur de l’activine de type IIB (ACTR‑IIB), un récepteur transmembranaire sérine/thréonine kinase appartenant à la superfamille du TGF‑β, qui se lie aux activines, à la myostatine (GDF8) et à des ligands apparentés. Après liaison du ligand, ACTR‑IIB forme des complexes avec des récepteurs de type I afin d’activer la signalisation SMAD2/3 et de moduler des programmes transcriptionnels contrôlant la prolifération, la différenciation et l’homéostasie tissulaire. Cet axe constitue un régulateur central de la biologie du muscle squelettique et du métabolisme, et influence également la signalisation reproductive et inflammatoire via les voies des activines. Une signalisation ACVR2B/ACTR‑IIB dérégulée a été associée à des phénotypes de masse musculaire altérée, à des processus liés à la fibrose et à certains contextes de biologie tumorale, ce qui soutient son utilisation comme nœud mécanistique dans des études axées sur les voies de signalisation.
ACTR-IIB Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ACVR2B dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ACVR2B. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ACVR2B. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ACVR2B.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.