Plasmide Double Nickase (h) ACE2: sc-401131-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ACE2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ACE2 Double Nickase (h) et le plasmide ACE2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ACE2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ACE2 Antibody (E-11): sc-390851
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ACE2 | sc-401131-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ACE2 | sc-401131-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
L’enzyme de conversion de l’angiotensine 2 (ACE2) est une carboxypeptidase dépendante du zinc qui contrebalance le système rénine–angiotensine en convertissant l’angiotensine II en angiotensine-(1–7), déplaçant ainsi la signalisation d’axes vasoconstricteurs et pro-inflammatoires vers des voies liées au récepteur MAS. L’ACE2 humaine est exprimée à la surface des cellules épithéliales et endothéliales et contribue à la régulation du tonus vasculaire, du remodelage tissulaire, des réponses au stress oxydatif et de la signalisation inflammatoire. Au-delà de son rôle enzymatique, ACE2 influence le trafic des récepteurs et les réseaux de protéases membranaires qui façonnent la protéostasie de surface cellulaire. Une expression ou une activité d’ACE2 dérégulée a été associée à des pathologies cardiovasculaires et rénales, à l’inflammation métabolique et à une dysfonction de la barrière épithéliale, ce qui en fait une cible majeure pour les études mécanistiques de la réponse de l’hôte et de l’homéostasie tissulaire.
ACE2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ACE2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ACE2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ACE2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ACE2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.