Plasmide Double Nickase (h) ACE: sc-400759-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ACE correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ACE Double Nickase (h) et le plasmide ACE Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ACE. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ACE Antibody (2E2): sc-23908
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ACE | sc-400759-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ACE | sc-400759-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
L’enzyme de conversion de l’angiotensine (ECA, ACE) est une dipeptidyl-carboxypeptidase dépendante du zinc, ancrée à la surface cellulaire, qui convertit l’angiotensine I en angiotensine II, un vasoconstricteur, et inactive la bradykinine. Par ces réactions, l’ECA est un régulateur central du système rénine–angiotensine, influençant le tonus vasculaire, l’équilibre électrolytique, la signalisation inflammatoire et le remodelage tissulaire. L’activité de l’ECA module les voies de signalisation en aval des récepteurs de l’angiotensine II, notamment les réponses associées à MAPK et à NF-κB, avec des effets dépendants du contexte sur la fonction endothéliale et les processus liés à la fibrose. Une expression altérée de l’ECA ou des variations génétiques ont été associées à des phénotypes cardiométaboliques et rénaux, et l’ECA est fréquemment étudiée dans des modèles d’hypertension, de remodelage cardiovasculaire et de biologie des maladies rénales.
ACE Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ACE dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ACE. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ACE. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ACE.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.