ABHD15 Double Nickase Plasmid (m): sc-426589-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das ABHD15 Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- ABHD15 Double-Nickase-Plasmid (m) und ABHD15 Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Abhd15 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
ABHD15 Double Nickase Plasmid (m) | sc-426589-NIC | 20 µg | $410.00 |
Abhd15 kodiert ABHD15, ein Protein mit α/β‑Hydrolase‑Domäne, das an der metabolischen Regulation und der insulinabhängigen Signalübertragung beteiligt ist und dem Funktionen bei der Modulation der Adipozytenfunktion sowie der Energiehomöostase zugeschrieben werden. In Mausmodellen wurde ABHD15 mit Signalwegen in Verbindung gebracht, die die Glukoseverwertung und den Lipidstoffwechsel beeinflussen, einschließlich einer Wechselwirkung mit phosphodiesterase‑regulierter cAMP‑Signalgebung, die Adipogenese und Insulinsensitivität mitbestimmen kann. Eine Veränderung der Abhd15‑Expression ist daher für mechanistische Untersuchungen metabolischer Phänotypen wie der adipositasassoziierten Insulinresistenz und damit verbundenem inflammatorischem Umbau des Fettgewebes relevant. Diese Eigenschaften machen ABHD15 zu einem geeigneten Ziel, um Gennetzwerke zu analysieren, die Nährstoffsensorik, intrazelluläre Second‑Messenger‑Signalwege und systemische metabolische Anpassung koordinieren.
ABHD15 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Abhd15-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Abhd15 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Abhd15-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Abhd15-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.