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ABCG2双切口酶质粒(h) | sc-416737-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ABCG2双切口酶质粒(h2) | sc-416737-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ABCG2(亦称 BCRP)编码一种 ATP 结合盒(ABC)外排转运蛋白,可限制多种外源性化合物和内源性代谢物在细胞内的累积。ABCG2 主要定位于屏障组织和具有干性特征的细胞群体的质膜上,通过 ATP 依赖性的底物外排参与上皮转运、细胞解毒,并在氧化与化学应激条件下提供保护。其活性通过调控细胞内对小分子及卟啉相关代谢物的暴露水平,与药代动力学处理过程和应激反应程序相互交织。ABCG2 的表达或功能失调常在多药耐药表型、组织屏障生物学与肿瘤异质性等研究背景中被重点关注,同时也涉及影响转运体活性的遗传变异。
ABCG2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ABCG2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ABCG2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ABCG2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ABCG2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。