Plasmide Double Nickase (h) ABC1: sc-401086-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ABC1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ABC1 Double Nickase (h) et le plasmide ABC1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ABCA1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ABC1 Antibody (AC10): sc-53482
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ABC1 | sc-401086-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ABC1 | sc-401086-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ABCA1 (ABC1) est un transporteur de la famille des cassettes de liaison à l’ATP (ATP-binding cassette) qui médie l’efflux cellulaire du cholestérol et des phospholipides vers l’apolipoprotéine A‑I, favorisant la formation des HDL naissantes et le transport inverse du cholestérol. En régulant l’homéostasie lipidique, ABCA1 influence la composition membranaire, l’organisation des radeaux lipidiques et des processus de signalisation en aval liés à la gestion du cholestérol par les macrophages et aux réponses inflammatoires. L’activité d’ABCA1 s’inscrit à l’interface des programmes transcriptionnels régulés par LXR/RXR et d’autres voies contrôlant la détection des stérols et le métabolisme des lipoprotéines. Des perturbations génétiques ou fonctionnelles d’ABCA1 sont associées à des phénotypes de dyslipidémie et à des altérations de la biologie liée à l’athérogenèse, ce qui en fait une cible majeure pour des études mécanistiques du transport lipidique et des voies cardiométaboliques.
ABC1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ABCA1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ABCA1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ABCA1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ABCA1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.