Date published: 2026-7-11

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A20/TNFAIP3 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-423436-NIC

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Fichas de dados
  • alvos específicos: mouse
  • 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
  • A20/TNFAIP3O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
  • Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
  • Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
  • O Plasmídeo Double Nickase A20/TNFAIP3 (m) e o Plasmídeo Double Nickase A20/TNFAIP3 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Tnfaip3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
  • Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:A20/TNFAIP3 Anticorpo (A-12): sc-166692
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    Nome do ProdutoNumero de CatalogoUNIDPrecoQdeFAVORITOS

    A20/TNFAIP3 Plasmídeo duplo de Nickase (m)

    sc-423436-NIC
    20 µg
    $410.00

    A20/TNFAIP3 Plasmídeo duplo de Nickase (m2)

    sc-423436-NIC-2
    20 µg
    $410.00

    O gene murino **Tnfaip3** codifica a A20/TNFAIP3, uma enzima de edição de ubiquitina que atua como um regulador negativo central da sinalização inflamatória. A A20 limita a ativação das vias **NF-κB** e **MAPK** a jusante de receptores como **TNFR**, **IL-1R** e receptores do tipo Toll, modulando cadeias de ubiquitina ligadas por **K63** e **M1** em adaptadores-chave de sinalização. Ao controlar programas transcricionais induzidos por citocinas, a A20 influencia a homeostase imune inata e adaptativa, a sobrevivência celular e as respostas ao estresse. A atividade desregulada da A20 está implicada em modelos de autoimunidade, inflamação crônica e sinalização oncogênica, nos quais a ativação persistente de NF-κB contribui para fenótipos relevantes para a doença.

    A20/TNFAIP3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Tnfaip3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Tnfaip3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Tnfaip3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

    Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Tnfaip3 interrompido.

    Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.