Plásmido Doble Nickase (m) 5330417C22Rik: sc-432895-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)5330417C22Rik consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa 5330417C22Rik (m) y el plásmido de doble nickasa 5330417C22Rik (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a 5330417C22Rik. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) 5330417C22Rik | sc-432895-NIC | 20 µg | $410.00 |
El gen murino 5330417C22Rik codifica una proteína poco caracterizada, con anotación funcional limitada, y se estudia habitualmente como un marco de lectura abierto/transcrito no caracterizado en cribados a escala genómica y en conjuntos de datos de desarrollo. La evidencia disponible sugiere que podría contribuir a la homeostasis celular basal mediante funciones aún por definir en la regulación génica o en procesos asociados al ARN, según se infiere de perfiles de expresión y redes de coexpresión. Dado que su función molecular y su ubicación en vías biológicas siguen sin resolverse, 5330417C22Rik se investiga con frecuencia para conectar relaciones genotipo-fenotipo y para asignar función a nuevos loci. Los estudios de perturbación pueden ayudar a aclarar posibles vínculos con la biología específica de tejidos y con fenotipos relevantes para enfermedad en modelos de ratón, sin presuponer un papel clínico.
5330417C22Rik El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus 5330417C22Rik en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de 5330417C22Rik. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de 5330417C22Rik. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con 5330417C22Rik alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.