Plásmido Doble Nickase (h) 5α-Reductase 1: sc-402151-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)5α-Reductase 1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa 5α-Reductase 1 (h) y el plásmido de doble nickasa 5α-Reductase 1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SRD5A1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) 5α-Reductase 1 | sc-402151-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) 5α-Reductase 1 | sc-402151-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SRD5A1 codifica la 5α-reductasa 1 humana, una oxidorreductasa dependiente de NADPH localizada principalmente en el retículo endoplásmico que cataliza la conversión de testosterona en dihidrotestosterona y participa en un metabolismo más amplio de los esteroides. Al regular los niveles locales de andrógenos, SRD5A1 influye en la señalización del receptor de andrógenos y en los programas transcripcionales posteriores que determinan la diferenciación celular, la proliferación y la homeostasis tisular. La alteración de la expresión o la actividad de SRD5A1 se ha estudiado en contextos endocrinos y metabólicos y en la biología de enfermedades sensibles a andrógenos, incluidos trastornos del equilibrio esteroideo y modelos de tumores impulsados por hormonas. Como resultado, SRD5A1 se investiga con frecuencia para dilucidar el flujo esteroidogénico, la interrelación de la señalización androgénica y la regulación génica dependiente del contexto en células humanas.
5α-Reductase 1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SRD5A1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SRD5A1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SRD5A1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SRD5A1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.