Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
β2C Tubulin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400056
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- β2C Tubulin El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico β2C Tubulin, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: β2C Tubulin Anticuerpo (1A9): sc-134230
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
β2C Tubulin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400056 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
TUBB4B codifica la tubulina β2C, un componente central de los heterodímeros de tubulina α/β que se polimerizan para formar microtúbulos, los cuales sustentan la arquitectura del citoesqueleto, el transporte intracelular y el ensamblaje del huso mitótico. La remodelación dinámica de los microtúbulos es la base de procesos como la progresión del ciclo celular, el posicionamiento de orgánulos y la ciliogénesis, y se integra con vías que regulan la polaridad y las respuestas al estrés. Las alteraciones en el equilibrio de isotipos de tubulina y en la dinámica de los microtúbulos se asocian con frecuencia a fenotipos proliferativos, inestabilidad cromosómica y cambios en el comportamiento migratorio observados en múltiples contextos patológicos. Como nodo estructural y regulador en la biología dependiente de microtúbulos, la tubulina β2C constituye una diana útil para analizar el control citoesquelético de la división celular y del tráfico intracelular.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO β2C Tubulin (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TUBB4B en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TUBB4B junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TUBB4B tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína β2C Tubulin.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TUBB4B para la investigación de la señalización de β2C Tubulin, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de TUBB4B críticos para la función de β2C Tubulin
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TUBB4B para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido β2C Tubulin CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido β2C Tubulin CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TUBB4B. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR β2C Tubulin (h) y el plásmido HDR β2C Tubulin (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TUBB4B para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TUBB4B definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.