α N-catenin Plasmide Double Nickase (h): sc-405168-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- α N-catenin Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il α N-catenin Double Nickase Plasmid (h) e il α N-catenin Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CTNNA2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
α N-catenin Plasmide Double Nickase (h) | sc-405168-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
α N-catenin Plasmide Double Nickase (h2) | sc-405168-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CTNNA2 codifica l’α N-catenina umana, una proteina delle giunzioni aderenti che lega l’actina e collega i complessi cadherina–β-catenina al citoscheletro corticale, stabilizzando l’adesione cellula–cellula e regolando l’architettura dei tessuti. Coordinando la meccanica delle giunzioni, l’α N-catenina influenza il rimodellamento del citoscheletro, la connettività neuronale e gli output di segnalazione che intersecano le dinamiche di adesione associate a Wnt/β-catenina. L’attività di CTNNA2 è strettamente legata a processi quali la migrazione cellulare e l’organizzazione delle sinapsi, nei quali un’alterazione dell’impalcatura adesiva può perturbare la formazione delle reti e il posizionamento cellulare. Alterazioni genetiche e di espressione di CTNNA2 sono state associate a fenotipi neuroevolutivi e neuropsichiatrici, a supporto della sua utilità come bersaglio per studi meccanicistici della funzione cellulare dipendente dall’adesione.
α N-catenin Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CTNNA2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CTNNA2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CTNNA2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CTNNA2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.