Plásmido Doble Nickase (h) α N-catenin: sc-405168-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)α N-catenin consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa α N-catenin (h) y el plásmido de doble nickasa α N-catenin (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CTNNA2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) α N-catenin | sc-405168-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) α N-catenin | sc-405168-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CTNNA2 codifica la α N-catenina humana, una proteína de las uniones adherentes que se une a la actina y conecta los complejos cadherina–β-catenina con el citoesqueleto cortical para estabilizar la adhesión célula–célula y regular la arquitectura tisular. Al coordinar la mecánica de las uniones, la α N-catenina influye en la remodelación del citoesqueleto, la conectividad neuronal y las salidas de señalización que se entrecruzan con la dinámica de adhesión asociada a Wnt/β-catenina. La actividad de CTNNA2 está estrechamente vinculada a procesos como la migración celular y la organización de sinapsis, donde las alteraciones en el andamiaje de adhesión pueden perturbar la formación de redes y el posicionamiento celular. Las perturbaciones genéticas y de expresión en CTNNA2 se han asociado con fenotipos del neurodesarrollo y neuropsiquiátricos, lo que respalda su utilidad como diana para estudios mecanísticos de la función celular dependiente de la adhesión.
α N-catenin El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CTNNA2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CTNNA2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CTNNA2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CTNNA2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.