FCM Fixation buffer (10X)

Il tampone di fissazione per citometria a flusso (FCM) (10X) è un reagente fondamentale impiegato nella ricerca immunologica e in biologia cellulare, in particolare nelle applicazioni di citometria a flusso. Questo tampone specializzato è formulato meticolosamente per preservare le strutture cellulari e gli epitopi antigenici, consentendo così un'analisi accurata e affidabile delle popolazioni cellulari. La composizione del tampone di fissazione FCM (10X) comprende tipicamente la paraformaldeide (PFA) come agente fissativo primario, insieme ad altri componenti come il tampone fosfato di sodio e il saccarosio. Il PFA reagisce con le proteine cellulari, formando legami incrociati che immobilizzano le strutture cellulari e impediscono la degradazione o l'alterazione degli epitopi antigenici. Il tampone fosfato di sodio mantiene la stabilità del pH della soluzione, assicurando condizioni di fissazione ottimali, mentre il saccarosio contribuisce a mantenere l'osmolarità cellulare e a minimizzare la contrazione o il rigonfiamento delle cellule durante la fissazione. Negli esperimenti di citometria a flusso, il tampone di fissazione FCM (10X) viene utilizzato per arrestare i processi cellulari e preservare la morfologia cellulare e i modelli di espressione proteica. Le cellule vengono prima trattate con il tampone, che penetra rapidamente nella membrana cellulare e lega in modo incrociato le proteine intracellulari al contatto. Questa fase di fissazione immobilizza efficacemente i componenti cellulari, compresi gli antigeni, all'interno della cellula, preservandone la distribuzione spaziale e l'abbondanza relativa. I ricercatori utilizzano il tampone di fissazione FCM (10X) in varie applicazioni di citometria a flusso, tra cui l'immunofenotipizzazione, l'analisi del ciclo cellulare e la colorazione intracellulare. Dopo la fissazione, le cellule possono essere permeabilizzate per consentire l'accesso di anticorpi o coloranti fluorescenti ai bersagli intracellulari, consentendo l'analisi multiparametrica dell'espressione proteica e delle funzioni cellulari. L'ottimizzazione delle condizioni di fissazione, compresa la concentrazione del tampone, il tempo di fissazione e la temperatura, è essenziale per ottenere risultati ottimali negli esperimenti di citometria a flusso. Una fissazione inadeguata può portare all'agglomerazione delle cellule, alla perdita di antigenicità o al legame non specifico degli anticorpi, incidendo negativamente sulla qualità e sull'interpretazione dei dati.