ZDHHC20 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-406353-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ZDHHC20O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ZDHHC20 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ZDHHC20 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ZDHHC20. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ZDHHC20 Anticorpo (A-4): sc-518217
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ZDHHC20 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-406353-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ZDHHC20 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-406353-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ZDHHC20 codifica uma palmitoiltransferase da família DHHC que catalisa a S-palmitoilação de proteínas substrato, regulando a associação à membrana, o tráfego subcelular e a estabilidade de proteínas de sinalização. Por meio do controlo dinâmico dessa modificação lipídica, a ZDHHC20 influencia processos como a sinalização de recetores, o transporte vesicular e a organização de microdomínios de membrana que moldam vias a jusante. Programas de palmitoilação alterados envolvendo a ZDHHC20 têm sido associados a fenótipos de crescimento e migração celular desregulados e têm sido explorados no contexto da biologia do cancro e de outras doenças em que a fidelidade da sinalização de membrana está comprometida. Como resultado, a ZDHHC20 é um alvo útil para estudar como a localização de proteínas dependente de palmitoilação afeta a transdução de sinal e a homeostase celular em modelos humanos.
ZDHHC20 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ZDHHC20 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ZDHHC20. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ZDHHC20. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ZDHHC20 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.