Xanthine Oxidase Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401185
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Xanthine Oxidase El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Xanthine Oxidase, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Xanthine Oxidase Anticuerpo (A-3): sc-398548
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Xanthine Oxidase Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401185 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen humano **XDH** codifica la xantina oxidasa, una enzima dependiente de molibdeno que cataliza las etapas finales del catabolismo de purinas al convertir la hipoxantina en xantina y la xantina en ácido úrico. Durante estas reacciones puede generar especies reactivas de oxígeno, lo que vincula el metabolismo de purinas con la homeostasis redox y la señalización del estrés oxidativo. La actividad de la xantina oxidasa influye en la función endotelial, las respuestas inflamatorias y la adaptación metabólica, y su desregulación se ha asociado con procesos relacionados con la hiperuricemia, mecanismos de lesión por isquemia–reperfusión y vías oxidativas relevantes para enfermedades cardiometabólicas. XDH también se estudia en el contexto del metabolismo hepático y del equilibrio sistémico del nitrógeno, donde las alteraciones en el recambio de purinas pueden reconfigurar las respuestas celulares al estrés.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Xanthine Oxidase (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen XDH en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del XDH junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de XDH tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Xanthine Oxidase.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en XDH para la investigación de la señalización de Xanthine Oxidase, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de XDH críticos para la función de Xanthine Oxidase
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de XDH para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Xanthine Oxidase CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Xanthine Oxidase CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus XDH. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Xanthine Oxidase (h) y el plásmido HDR Xanthine Oxidase (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología XDH para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana XDH definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.