VWA5B2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406578

Visão geral

VWA5B2 codifica uma proteína que contém um domínio semelhante ao fator de von Willebrand A (VWA), um motivo modular frequentemente envolvido em interações proteína–proteína que sustentam a organização da matriz extracelular, a sinalização relacionada à adesão e a arquitetura dos tecidos. Embora o VWA5B2 seja menos amplamente caracterizado do que muitas proteínas com domínio VWA, sua composição de domínios prevista sugere papéis na ancoragem ou na formação de complexos de suporte (scaffolding) que influenciam a adesão celular, a motilidade e a mecanotransdução. A regulação alterada de processos de adesão e associados à matriz é frequentemente ligada a um controle de crescimento desregulado e a fenótipos invasivos, tornando o VWA5B2 um alvo útil para investigar vias que conectam interações célula–matriz à expressão gênica e à dinâmica do citoesqueleto. A perturbação genética de VWA5B2 pode, portanto, ajudar a definir sua contribuição para respostas ao estresse dependentes do contexto e para a reorganização de redes observada em estados celulares relevantes para doenças.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO VWA5B2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene VWA5B2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do VWA5B2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do VWA5B2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína VWA5B2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de VWA5B2 para a investigação da sinalização de VWA5B2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) VWA5B2 críticos para a função VWA5B2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos VWA5B2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo VWA5B2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo VWA5B2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus VWA5B2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo VWA5B2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR VWA5B2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia VWA5B2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo VWA5B2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.