Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide Double Nickase (h) VEGF-D: sc-401669-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) VEGF-D correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide VEGF-D Double Nickase (h) et le plasmide VEGF-D Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant VEGFD. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: VEGF-D Antibody (C-12): sc-373866
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) VEGF-D | sc-401669-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) VEGF-D | sc-401669-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **VEGFD** code **VEGF-D**, un membre sécrété de la famille des VEGF qui régule la lymphangiogenèse et l’angiogenèse en se liant à **VEGFR-3 (FLT4)** et **VEGFR-2 (KDR)**. Le clivage protéolytique augmente l’affinité de liaison aux récepteurs et favorise la migration et la survie des cellules endothéliales, ainsi que le remodelage vasculaire, via les voies de signalisation **PI3K–AKT**, **MAPK/ERK** et **PLCγ** en aval. La signalisation dépendante de VEGF-D contribue au développement des vaisseaux lymphatiques, à l’homéostasie des fluides tissulaires et au trafic des cellules immunitaires dans le microenvironnement tumoral. Une expression dérégulée de VEGF-D ou une activité anormale de cette voie a été associée à des altérations du remodelage lymphatique et à la dissémination métastatique dans de multiples contextes cancéreux, ainsi qu’à des phénotypes inflammatoires et œdémateux pertinents pour la recherche en biologie vasculaire.
VEGF-D Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus VEGFD dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de VEGFD. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de VEGFD. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de VEGFD.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.