VCAM-1 Lentiviral Activation Particles (m): sc-423659-LAC

Vcam1 kodiert das vaskuläre Zelladhäsionsmolekül 1 (VCAM‑1), einen Adhäsionsrezeptor der Immunglobulin-Superfamilie, der auf aktivierten Endothelzellen sowie auf einigen stromalen und Immunzellpopulationen exprimiert wird. VCAM‑1 bindet Integrine wie α4β1 (VLA‑4) und vermittelt dadurch eine feste Adhäsion von Leukozyten sowie deren transendotheliale Migration; damit ist es ein zentraler Regulator des entzündlichen Zelltraffickings und der Immunüberwachung von Geweben. Seine Expression wird durch zytokinvermittelte Signalprogramme einschließlich der NF‑κB‑ und MAPK‑Signalwege induziert, wodurch VCAM‑1 mit Endothelaktivierung, vaskulärem Remodeling und der Rekrutierung von Leukozyten verknüpft ist. In Mausmodellen wird eine fehlregulierte Vcam1‑Aktivität breit in Zusammenhängen wie chronischer Entzündung, Atherosklerose, Neuroinflammation, Ischämie‑Reperfusionsschädigung und der Bildung metastatischer Nischen untersucht.

VCAM-1 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Vcam1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

VCAM-1 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Vcam1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen VCAM-1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Vcam1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.