Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO Vav2 (m): sc-423656
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Vav2 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Vav2, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Vav2 Antibody (F-6): sc-271442
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Vav2 (m) | sc-423656 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Vav2 code un facteur d’échange de nucléotides guanine (GEF) pour les GTPases de la famille Rho, reliant la signalisation des récepteurs à activité tyrosine kinase et des intégrines à l’activation de Rac1 et de voies apparentées. En coordonnant le remodelage du cytosquelette d’actine, l’adhésion cellulaire et le trafic membranaire, VAV2 influence la migration, l’étalement et les réponses dépendantes des facteurs de croissance. Dans les systèmes murins, Vav2 est étudié en immunologie et en biologie vasculaire, ainsi que dans des contextes neuronaux et épithéliaux où la dynamique du cytosquelette façonne l’homéostasie tissulaire. Une signalisation VAV2 dérégulée a été impliquée dans des phénotypes de prolifération et d’invasion aberrants et sert de nœud mécanistique dans des modèles de signalisation oncogénique et inflammatoire.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Vav2 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Vav2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Vav2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Vav2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Vav2.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Vav2 pour l'étude de la signalisation de Vav2, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Vav2 essentiels à la fonction de Vav2
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Vav2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Vav2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Vav2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Vav2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Vav2 plasmide HDR (m) et le Vav2 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Vav2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Vav2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.