Vav Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-400606-LAC
- alvos específicos: human
- 200 µl de alto titulo de partículas de ativação lentiviral CRISPR/dCas9 prontas para a transdução of transduction-ready
- Vav as Partículas de Ativação Lentiviral (h) agem como um sistema de ativação de transcrição sinergética ao mediador de ativação (SAM, que foi criado para regular positivamente com especificidade e eficiência a expressão genética via transdução celular com lentivirus
- Vav As partículas de ativação lentivirais (h) contem os seguintes elementos de ativação SAM:uma nuclease Cas9 (dCas9) desativada (D10A and N863A) ligadas a um domínio de transactivacao VP64, uma proteína de fusão MS2-p65-HSF1 e um alvo-especifico de RNA guia de 20 nt guia RNA. Ainda, as partículas contem genes de resistência a blasticidina, higromicina e puromicina
- Durante a transdução, o complexo SAM se liga a uma região especifica de aproximadamente 200-250 nt upstream da região de inicia da transcrição e assegura um recrutamento robusto de fatores de transcrição para uma eficiente ativação genética
- Os gRNAs codificados pelo Vav Plasmídeo de Ativação Lentiviral (h) e pelo Vav Plasmídeo de Ativação Lentiviral (h2) têm como alvo regiões reguladoras distintas do promotor VAV1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo: Vav Anticorpo (D-7): sc-8039
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Vav Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h) | sc-400606-LAC | 200 µl | $455.00 |
O VAV1 humano codifica a Vav, um fator de troca de nucleotídeos de guanina hematopoético que conecta a sinalização de imunorreceptores e citocinas às GTPases da família Rho, incluindo RAC1 e CDC42. Após fosforilação a jusante das vias de TCR/BCR e de receptores Fc, a Vav coordena a remodelação do citoesqueleto de actina, a ativação de integrinas, o fluxo de cálcio e programas transcricionais que moldam o desenvolvimento, a ativação e a função efetora de linfócitos. A atividade de VAV1 interage com as vias de sinalização PI3K–AKT, PLCγ e MAPK para regular a adesão celular, a migração e a formação da sinapse imunológica. A desregulação da sinalização de VAV1 e mutações têm sido associadas à disfunção imunológica e à sinalização oncogênica em neoplasias hematológicas, sustentando seu uso em estudos de redes de sinalização imune e mecanismos de transformação.
As Partículas de Ativação Lentivirais Vav (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de VAV1 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.
As Partículas de Ativação Lentivirais Vav (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição VAV1, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de Vav. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo VAV1 e a arquitetura reguladora.
O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.