Vasohibin-1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-403526

Übersicht

VASH1 kodiert Vasohibin-1, einen von Endothelzellen gebildeten Regulator der Angiogenese, der durch proangiogene Signale induziert wird und als negativer Feedback-Mechanismus die Neubildung von Blutgefäßen begrenzt. Vasohibin-1 wird mit der Modulation der Proliferation und Migration von Endothelzellen, dem vaskulären Remodeling sowie der Mikrotubuli-Dynamik in Verbindung gebracht – unter anderem über seine Tubulin-Carboxypeptidase-Aktivität und durch Interaktionen mit Kofaktoren wie SVBP. Veränderte VASH1-Expression wurde in der tumorassoziierten Gefäßversorgung sowie bei Erkrankungen mit pathologischer Neovaskularisation und chronischer Entzündung beschrieben, was seine Bedeutung für Untersuchungen der vaskulären Homöostase unterstreicht. Daher wird VASH1 häufig im Kontext von Signalwegen untersucht, die endotheliale Stressantworten, Gewebeischämie und extrazelluläre Signalgebung steuern, welche die angiogene Mikroumgebung prägt.

Das Vasohibin-1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des VASH1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des VASH1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von VASH1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Vasohibin-1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von VASH1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Vasohibin-1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf VASH1-Exone abzielen, die für die Vasohibin-1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere VASH1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Vasohibin-1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom Vasohibin-1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des VASH1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Vasohibin-1 HDR-Plasmid (h) und Vasohibin-1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von VASH1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten VASH1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.