Plásmido Doble Nickase (h) USP1: sc-406837-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)USP1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa USP1 (h) y el plásmido de doble nickasa USP1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a USP1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) USP1 | sc-406837-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) USP1 | sc-406837-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El USP1 humano codifica una enzima desubiquitinante que regula la estabilidad del genoma al revertir eventos de monoubiquitinación dentro de la vía de reparación del ADN de la anemia de Fanconi, incluida la desubiquitinación de FANCD2/FANCI. En coordinación con UAF1, USP1 modula la señalización del daño en el ADN durante la fase S e influye en la elección y la eficiencia de mecanismos de reparación como la recombinación homóloga y la síntesis de ADN por translesión. La actividad de USP1 también afecta las respuestas al estrés de replicación y el control de los puntos de control del ciclo celular al ajustar el recambio de proteínas dependiente de ubiquitina. La disfunción de USP1 se ha vinculado con una capacidad de reparación del ADN alterada, inestabilidad cromosómica y fenotipos oncogénicos en múltiples contextos tumorales, lo que la convierte en un objetivo frecuente en estudios mecanísticos sobre el mantenimiento del genoma.
USP1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus USP1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de USP1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de USP1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con USP1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.