Plasmide Double Nickase (h) UBXN2B: sc-407871-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) UBXN2B correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide UBXN2B Double Nickase (h) et le plasmide UBXN2B Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant UBXN2B. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) UBXN2B | sc-407871-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) UBXN2B | sc-407871-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
UBXN2B (protéine 2B contenant un domaine UBX, « ubiquitin regulatory X domain-containing protein 2B ») est un adaptateur à domaine UBX impliqué dans le contrôle qualité des protéines dépendant de l’ubiquitine et dans le remodelage des complexes protéiques. Grâce à ses interactions avec des AAA ATPases telles que VCP/p97, UBXN2B est en mesure d’influencer la dégradation associée au réticulum endoplasmique (ERAD), la protéostasie et des voies de signalisation adaptatives au stress liées à l’élimination des protéines mal repliées. Ces processus croisent la régulation du cycle cellulaire, l’apoptose et les réponses inflammatoires, faisant d’UBXN2B un nœud pertinent pour l’étude de voies perturbées dans la neurodégénérescence, la biologie du cancer et d’autres troubles associés à la protéostasie. Une perturbation fonctionnelle d’UBXN2B chez l’humain peut ainsi servir à analyser comment le renouvellement médié par l’ubiquitine façonne les réseaux de signalisation et l’homéostasie cellulaire.
UBXN2B Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus UBXN2B dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de UBXN2B. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de UBXN2B. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de UBXN2B.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.