Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Plásmido Doble Nickase (h) Ubr4: sc-408481-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Ubr4 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Ubr4 (h) y el plásmido de doble nickasa Ubr4 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a UBR4. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Ubr4 Anticuerpo (21-Y): sc-100615
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Ubr4 | sc-408481-NIC | 20 µg | $410.00 |
UBR4 codifica Ubr4, un factor asociado a ligasas de ubiquitina de gran tamaño implicado en el control de calidad de proteínas dependiente de ubiquitina y en la regulación del recambio proteico. Mediante su participación en procesos relacionados con la regla del extremo N y en redes más amplias de proteostasis, Ubr4 influye en la homeostasis celular, las respuestas al estrés y las dinámicas del citoesqueleto o asociadas a membranas que determinan la morfología celular y el tráfico intracelular. La alteración de la señalización por ubiquitina y de la proteostasis es relevante para los mecanismos subyacentes a la neurodegeneración, la biología del cáncer y otros trastornos caracterizados por cambios en la estabilidad de las proteínas y la adaptación de las vías de señalización. Como gen humano ampliamente expresado en los tejidos, UBR4 se estudia con frecuencia para comprender cómo la regulación mediada por ubiquitina se integra con las rutas del desarrollo y de mantenimiento de la homeostasis.
Ubr4 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus UBR4 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de UBR4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de UBR4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con UBR4 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.