Tris Buffered Saline with Tween 20: 5 L of 20X

O Tris Buffered Saline with Tween 20 (TBST), particularmente numa solução concentrada 20X, é amplamente utilizado na investigação bioquímica e de biologia molecular como tampão de lavagem e como base para diluir anticorpos e outras proteínas. O TBST combina a capacidade de tamponamento do Tris (tris(hidroximetil)aminometano), a força iónica e o controlo da osmolaridade fornecidos pelo soro fisiológico (cloreto de sódio) e as propriedades tensioactivas do Tween 20. O papel principal do Tris na TBST é manter um pH estável, crucial para garantir a integridade estrutural e a funcionalidade das proteínas durante as experiências. A solução salina aumenta a utilidade desta solução ao proporcionar um ambiente iónico semelhante ao de muitos sistemas biológicos, o que é importante para manter a solubilidade das proteínas e reduzir as interacções não específicas. O Tween 20, um tensioativo não iónico, é incluído para diminuir a tensão superficial e melhorar as propriedades molhantes do tampão. Isto é especialmente útil em ensaios imunológicos como Western blotting, ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) e imunocoloração, onde ajuda a reduzir a ligação não específica e o ruído de fundo, aumentando assim a relação sinal-ruído. O Tween 20 ajuda a permeabilizar as membranas celulares e os tecidos, permitindo um acesso mais eficaz dos anticorpos às proteínas intracelulares e ligadas às membranas. Na investigação, o TBST é utilizado principalmente durante os passos de lavagem destes ensaios, onde remove o excesso de anticorpos e proteínas não ligadas sem retirar os anticorpos ligados ao alvo. Este equilíbrio preciso de tamponamento, força iónica e ação surfactante faz do TBST uma ferramenta indispensável na análise detalhada das interacções e funções das proteínas.