Trimethylammonium phosphate solution

A solução de fosfato de trimetilamónio é um reagente especializado normalmente utilizado na investigação bioquímica e de biologia molecular, particularmente na purificação e análise de ácidos nucleicos. Esta solução é meticulosamente formulada para facilitar a precipitação selectiva e o isolamento de ácidos nucleicos de amostras biológicas complexas. A composição da solução de fosfato de trimetilamónio é normalmente constituída por cloreto de trimetilamónio (TMAC) e tampão fosfato. O TMAC actua como um agente caotrópico, rompendo as ligações de hidrogénio e as interacções hidrofóbicas entre os ácidos nucleicos e as proteínas, promovendo assim a solubilidade dos ácidos nucleicos e evitando ligações não específicas. O tampão fosfato mantém o pH da solução, assegurando condições óptimas para a estabilidade e precipitação dos ácidos nucleicos. Na investigação, a solução de fosfato de trimetilamónio é normalmente utilizada em protocolos de extração de ácidos nucleicos, particularmente para a purificação de ARN de lisados de células ou amostras de tecidos. A adição de TMAC promove a precipitação selectiva do ARN, permitindo a remoção eficaz de proteínas contaminantes, lípidos e outros componentes celulares. Isto facilita o isolamento de ARN de alta qualidade, adequado para aplicações a jusante, como a transcrição reversa - reação em cadeia da polimerase (RT-PCR), análise da expressão genética e sequenciação de ARN. Além disso, a solução de fosfato de trimetilamónio tem sido utilizada em estudos que envolvem a hibridação de ácidos nucleicos e a análise de microarranjos. As suas propriedades caotrópicas ajudam na desnaturação de duplexes de ácido nucleico, permitindo a ligação eficiente de sequências complementares em reacções de hibridação. Isto permite a deteção e análise de alvos específicos de ácidos nucleicos em amostras biológicas complexas. Os esforços de investigação em curso centram-se na otimização das formulações de soluções de fosfato de trimetilamónio e na exploração das suas aplicações em tecnologias emergentes de ácidos nucleicos, como a sequenciação de uma única célula e a transcriptómica espacial.