Plásmido Doble Nickase (h) TRIM72: sc-403554-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)TRIM72 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa TRIM72 (h) y el plásmido de doble nickasa TRIM72 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a TRIM72. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TRIM72 Anticuerpo (A-10): sc-514706
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) TRIM72 | sc-403554-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) TRIM72 | sc-403554-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TRIM72 (también conocido como MG53) codifica una ligasa E3 de ubiquitina con motivo tripartito, enriquecida en músculo, que coordina la reparación de la membrana plasmática y la proteostasis en respuesta a lesiones mecánicas u oxidativas. TRIM72 participa en el tráfico vesicular y en la señalización inducida por daño al actuar como andamiaje de complejos de reparación y modular el recambio dependiente de ubiquitina de componentes clave, integrándose con procesos de respuesta al estrés y remodelación de membranas. En músculo estriado y cardiomiocitos, la actividad de TRIM72 influye en la resiliencia celular al regular la eficiencia de reparación y las señales inflamatorias y metabólicas posteriores. La expresión o función desregulada de TRIM72 se ha asociado con fenotipos de daño muscular y estados de estrés cardiometabólico, lo que la hace relevante para estudios mecanísticos de la integridad de membrana y la señalización de estrés en células humanas.
TRIM72 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus TRIM72 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de TRIM72. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de TRIM72. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con TRIM72 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.