Plasmide Double Nickase (h) TRIM16: sc-409792-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) TRIM16 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TRIM16 Double Nickase (h) et le plasmide TRIM16 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TRIM16. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TRIM16 Antibody (B-6): sc-398851
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) TRIM16 | sc-409792-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) TRIM16 | sc-409792-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TRIM16 code une protéine de la famille des motifs tripartites (TRIM) qui agit comme ligase E3 de l’ubiquitine et comme facteur d’échafaudage, coordonnant le renouvellement des protéines, la dynamique du cytosquelette et la signalisation en réponse au stress. TRIM16 a été associée à la régulation de l’organisation des filaments intermédiaires, de la protéostasie et à la modulation de programmes transcriptionnels influençant la différenciation et la motilité cellulaires. Par des mécanismes dépendants de l’ubiquitine et des interactions protéine–protéine, TRIM16 peut influer sur des voies contrôlant les réponses immunitaires innées, l’adaptation au stress oxydatif et le contrôle de la croissance. Des altérations de l’expression ou de l’activité de TRIM16 ont été associées à la biologie tumorale et à des phénotypes inflammatoires, ce qui en fait une cible utile pour des études mécanistiques des réseaux de signalisation et de l’homéostasie cellulaire.
TRIM16 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TRIM16 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TRIM16. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TRIM16. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TRIM16.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.