TRAP95 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405827
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TRAP95 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TRAP95, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TRAP95 Anticorpo (F83): sc-130439
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TRAP95 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405827 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
MED16 codifica a TRAP95, uma subunidade essencial do complexo Mediator que faz a ponte entre fatores de transcrição específicos de sequência e a RNA polimerase II, coordenando a expressão gênica dependente de estímulos. A TRAP95 contribui para programas de regulação transcricional ligados ao controle do ciclo celular, à diferenciação e à sinalização responsiva ao estresse, refletindo seu papel na integração de múltiplas vias a montante em promotores e enhancers. A alteração da função do Mediator, incluindo perturbações de MED16, tem sido associada a uma ampla desregulação transcricional observada no câncer e em outros distúrbios de identidade celular e homeostase. Como proteína reguladora nuclear humana, a TRAP95 é comumente estudada por sua contribuição para redes de transcrição e para o controle da expressão gênica associado à cromatina.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TRAP95 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MED16 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MED16, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MED16 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TRAP95.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MED16 para a investigação da sinalização de TRAP95, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MED16 críticos para a função TRAP95
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MED16 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TRAP95 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo TRAP95 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MED16. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TRAP95 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR TRAP95 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MED16 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MED16 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.