translin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-407354-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- translinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase translin (h) e o Plasmídeo Double Nickase translin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TSN. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:translin Anticorpo (C-2): sc-390472
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
translin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-407354-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
translin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-407354-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TSN codifica a translin, uma proteína conservada de ligação a ácidos nucleicos que forma um complexo com a trax e contribui para o metabolismo de RNA, incluindo a regulação da estabilidade e do transporte de mRNA e de vias de pequenos RNAs. A translin tem sido associada ao controle gênico pós-transcricional no citoplasma e no núcleo e está implicada em processos como respostas ao estresse e função neuronal por meio da modulação do destino dos RNAs. Alterações na atividade de TSN/translin foram relacionadas na literatura a programas de expressão gênica desregulados observados na biologia do câncer e a fenótipos neurodesenvolvimentais ou neuropsiquiátricos. Essas características tornam TSN um nó útil para estudar a regulação centrada em RNA do estado celular e a plasticidade de vias.
translin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TSN em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TSN. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TSN. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TSN interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.